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技術(shù)文章 / article
鑒別ATCC細(xì)胞株真?zhèn)蔚姆椒?/h1>
原載自：www.haibayinye.com[技術(shù)資料頻道] 2017-10-24 瀏覽次數(shù)：2576
ATCC細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱為ATCC細(xì)胞株確定性，也就是說，ATCC細(xì)胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法，由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群重要的角色。ATCC細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。
原代培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后即為細(xì)胞系，由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細(xì)胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代要落實好，或傳代次數(shù)有限， 可稱為有限細(xì)胞系更默契了，如可以連續(xù)培養(yǎng)先進技術， 則稱為連續(xù)細(xì)胞系，培養(yǎng)50代以上并無限培養(yǎng)下去不合理波動。 所以ATCC細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志的培養(yǎng)細(xì)胞深入。從培養(yǎng)代數(shù)來講，可培養(yǎng)到40-50代前沿技術。ATCC細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。對于人類腫瘤細(xì)胞性能，在體外培養(yǎng)半年以上多種方式，生長穩(wěn)定，并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系技術創新。
鑒別ATCC細(xì)胞株真?zhèn)蔚姆椒ǎ?/div>
一．利用干擾實驗即可辨別ATCC細(xì)胞株是否檢測目的抗原深入交流研討，方法如下：
(1) 將針對試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody: antigen≈1:2的混合孵育液(2) 37℃孵育15分鐘后，代替原試劑盒中的檢測抗體(3) 后續(xù)操作按照試劑盒說明書進(jìn)行廣泛應用，加檢測抗體關註度、酶復(fù)合物和底物(4) 實驗完畢后，檢測其標(biāo)準(zhǔn)曲線哪些領域，如果標(biāo)準(zhǔn)曲線良好則說明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配敢於挑戰，試劑盒檢測抗體針對的是非目的抗原，該試劑盒為偽劣假造ATCC細(xì)胞株建立和完善。 (5) 如果標(biāo)準(zhǔn)曲線無線性提供了遵循，則說明試劑盒檢測抗體已被目的抗原中和或干擾，影響了其實際試劑盒抗體的檢測作用大型，則該試劑盒檢測抗體針對的是目的抗原服務效率。
二． 如果購買了兩盒同一公司的ATCC細(xì)胞株A和B，利用交叉實驗即可辨別ATCC細(xì)胞株是否造假重要意義，方法如下：
(1) 取出購買的試劑盒A的包被板兩條統籌發展。
(2) 一條包被板加試劑盒A的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線深化涉外。
(3) 另一條包被板加試劑盒B的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(4) 后續(xù)操作按照試劑盒說明書進(jìn)行逐漸完善，加檢測抗體參與能力、酶復(fù)合物和底物。
(5) 實驗完畢后異常狀況，檢測兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線研究，如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線一致則說明兩個ATCC細(xì)胞株檢測的同一個指標(biāo)而非A和B，即該試劑盒為偽劣假造ATCC細(xì)胞株應用創新。
(6) 如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線不一致則說明兩個ATCC細(xì)胞株檢測的不同指標(biāo)提高，試劑盒A只能檢測A，不能檢測B的特性，即該試劑盒為正常的ATCC細(xì)胞株交流。
