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技術(shù)文章 / article
ATCC細(xì)胞系的細(xì)胞培養(yǎng)小技巧
原載自:www.haibayinye.com[技術(shù)資料頻道] 2018-04-24 瀏覽次數(shù):2891
ATCC細(xì)胞系液體培養(yǎng)基的保存要冷藏指導,因?yàn)橐后w培養(yǎng)基經(jīng)冷凍后再經(jīng)溶化時(shí)不合理波動,其溶液的pH值會(huì)發(fā)生改變提供有力支撐,溶液往往變堿推進一步,某些成分溶解也會(huì)受到影響對(duì)細(xì)胞生長不利認為。故液體培養(yǎng)基一定要存放在冷藏箱中集成,通常液體培養(yǎng)基在冷藏條件下可存放6個(gè)月 ~ 一年物聯與互聯。
ATCC細(xì)胞系的細(xì)胞培養(yǎng)小技巧:
1. 買細(xì)胞要去靠譜的地方買帶動擴大,比如 ATCC 或者斯信生物核心技術體系。一般上面會(huì)有針對(duì)細(xì)胞的介紹,這樣培養(yǎng)之前可以了解細(xì)胞正常生長的狀態(tài)圖持續發展、傳代必然趨勢、培養(yǎng)基的類型等。
2. 不管是買的細(xì)胞供給,還是別人惠贈(zèng)的細(xì)胞的方法,剛拿到手趕緊的做兩件事:檢測是否有支原體污染;迅速擴(kuò)增凍存,凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天zui 好更換一次培養(yǎng)基進行探討。
3. 發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染迅速處理掉落到實處,特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時(shí)。污染最新、污染很容易發(fā)現(xiàn)技術創新,支原體污染的話,細(xì)胞會(huì)長的慢重要作用,可以買個(gè)支原體檢測的試劑盒定期檢測一下持續向好。
4. 不同細(xì)胞生長周期不同習慣。有的生長很快,比如說 MDA-MB-231進展情況,傳代的時(shí)候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了的積極性。有的又是特別慢,比如 BT474至關重要,傳代是一分二不久前,復(fù)蘇起始的時(shí)候兩周多才能長滿。這就需要要在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中多多摸索提升行動。
5. 對(duì)于嬌弱的細(xì)胞合規意識,就得細(xì)心呵護(hù)。胰酶消化不能過久有效性,吹得時(shí)候要輕柔創新內容,離心時(shí)候也要注意轉(zhuǎn)速和時(shí)間。每天都要去看一下細(xì)胞廣泛關註,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況善於監督、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況。記住深入實施,是每天至關重要。
ATCC細(xì)胞系注意事項(xiàng):
1)操作前要洗手,進(jìn)入超凈臺(tái)后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試效果。試劑等瓶口也要擦試有所應。
2)點(diǎn)燃酒精燈,操作在火焰附近進(jìn)行合作關系,耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼著力提升,金屬器械燒灼時(shí)間不能太長,以免退火傳遞,并冷卻后才能夾取組織融合,吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼,以免燒焦形成碳膜相關性。
3)操作動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷完成的事情,但又不能太快,以防空氣流動(dòng)穩定,增加污染機(jī)會(huì)改造層面。
4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分,工作臺(tái)面上用品要布局合理優勢與挑戰。
5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位經驗分享。
6)吸溶液的吸管等不能混用。
ATCC細(xì)胞系的細(xì)胞培養(yǎng)小技巧:
1. 買細(xì)胞要去靠譜的地方買帶動擴大,比如 ATCC 或者斯信生物核心技術體系。一般上面會(huì)有針對(duì)細(xì)胞的介紹,這樣培養(yǎng)之前可以了解細(xì)胞正常生長的狀態(tài)圖持續發展、傳代必然趨勢、培養(yǎng)基的類型等。
2. 不管是買的細(xì)胞供給,還是別人惠贈(zèng)的細(xì)胞的方法,剛拿到手趕緊的做兩件事:檢測是否有支原體污染;迅速擴(kuò)增凍存,凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天zui 好更換一次培養(yǎng)基進行探討。
3. 發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染迅速處理掉落到實處,特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時(shí)。污染最新、污染很容易發(fā)現(xiàn)技術創新,支原體污染的話,細(xì)胞會(huì)長的慢重要作用,可以買個(gè)支原體檢測的試劑盒定期檢測一下持續向好。
4. 不同細(xì)胞生長周期不同習慣。有的生長很快,比如說 MDA-MB-231進展情況,傳代的時(shí)候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了的積極性。有的又是特別慢,比如 BT474至關重要,傳代是一分二不久前,復(fù)蘇起始的時(shí)候兩周多才能長滿。這就需要要在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中多多摸索提升行動。
5. 對(duì)于嬌弱的細(xì)胞合規意識,就得細(xì)心呵護(hù)。胰酶消化不能過久有效性,吹得時(shí)候要輕柔創新內容,離心時(shí)候也要注意轉(zhuǎn)速和時(shí)間。每天都要去看一下細(xì)胞廣泛關註,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況善於監督、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況。記住深入實施,是每天至關重要。
ATCC細(xì)胞系注意事項(xiàng):
1)操作前要洗手,進(jìn)入超凈臺(tái)后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試效果。試劑等瓶口也要擦試有所應。
2)點(diǎn)燃酒精燈,操作在火焰附近進(jìn)行合作關系,耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼著力提升,金屬器械燒灼時(shí)間不能太長,以免退火傳遞,并冷卻后才能夾取組織融合,吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼,以免燒焦形成碳膜相關性。
3)操作動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷完成的事情,但又不能太快,以防空氣流動(dòng)穩定,增加污染機(jī)會(huì)改造層面。
4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分,工作臺(tái)面上用品要布局合理優勢與挑戰。
5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位經驗分享。
6)吸溶液的吸管等不能混用。