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【產(chǎn)品推介】MSI標(biāo)準(zhǔn)品

原載自：www.haibayinye.com[技術(shù)資料頻道] 2021-04-01 瀏覽次數(shù)：2477

微衛(wèi)星不穩(wěn)定性（Microsatellite Instability,MSI）業務指導，是指由于在DNA復(fù)制時插入或缺失突變引起的微衛(wèi)星（Microsatellite,MS）序列長度改變的現(xiàn)象體系，常由錯配修復(fù)功能（Mismatch repair,MMR）缺陷引起發展。MS序列，是一些短而重復(fù)的DNA序列多樣性，一般由1~6個核苷酸組成智能設備，串聯(lián)重復(fù)排列，常見類型為雙堿基CA/GA/GT或單堿基A/T等有所應。MS序列可以位于基因的重要非編碼區(qū)足了準備，也可以位于基因的編碼區(qū)，多態(tài)性分布于整個基因組著力提升，個體差異大深刻內涵。MSI現(xiàn)象于1993年被Jacobs等人在結(jié)直腸癌中*發(fā)現(xiàn)，與癌癥發(fā)生有關(guān)融合，可以用于癌癥檢測交流等。

MSI檢測方法

MSI常由MMR基因突變及功能缺失導(dǎo)致。因此規劃，在檢測癌細胞中的MSI時提高，既可以通過檢測MMR基因缺失來確定是否發(fā)生MSI，如依賴于免疫組化技術(shù)的蛋白水平檢測進入當下，也可以直接檢測MSI的序列變化紮實，如PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）檢測等的分子水平檢測。

（一）免疫組化方法

免疫組化方法（Immunohistochemistry, IHC）：采用免疫組織化學(xué)方法檢測腫瘤組織中錯配修復(fù)基因MLH1新體系、MSH2投入力度、MSH6及PMS2的表達。任何一項錯配修復(fù)基因表達缺失不難發現，被定義為MSI貢獻法治，否則即為微衛(wèi)星穩(wěn)定（MSS）。其中一個表達缺失則稱為低度微衛(wèi)星不穩(wěn)定(MSI-L)發展需要，2種或2種以上蛋白表達缺失為高度微衛(wèi)星不穩(wěn)定(MSI-H)攻堅克難。

（二）分子水平的檢測

1.聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase chain reaction, PCR)技術(shù)
目前主要采用多重?zé)晒釶CR結(jié)合毛細管電泳的方法。通過PCR方法檢測特異的微衛(wèi)星重復(fù)序列擴增判定MSI狀態(tài)重要組成部分，比較腫瘤患者的標(biāo)本組織與正常組織的位點突變情況流程。其比較的位點為美國國家癌癥研究所（NCI）推薦的5個微衛(wèi)星位點：BAT25、BAT26勃勃生機、D5S346助力各業、D2S123及D17S250。其中≥2個位點發(fā)生改變判定為高度微衛(wèi)星不穩(wěn)定（MSI-H）提供有力支撐，僅1個位點發(fā)生改變判定為低度微衛(wèi)星不穩(wěn)定（MSI-L）應用，無位點改變判定為微衛(wèi)星穩(wěn)定（MSS）建議。有研究認為，二核苷酸重復(fù)序列的特異性和靈敏度比單核苷酸重復(fù)序列要低相貫通，因此關(guān)于MSI檢測的位點仍存在爭議用的舒心。Bacher等對266個微衛(wèi)星位點(其中包括單核苷酸、二核苷酸集聚效應、四核苷酸以及五核苷酸微衛(wèi)星位點)檢測的敏感性及準(zhǔn)確性進行評估集成，提出了Promega分析系統(tǒng)，該系統(tǒng)使用五個單核苷酸微衛(wèi)星位點(BAT-25, BAT-26, NR-21, NR-24和MONO-27)及兩個五核苷酸微衛(wèi)星位點(Penta C和Penta D)檢測MSI互動講。大量的實驗證實穩定性，MMR免疫組化檢測結(jié)果與MS的PCR檢測結(jié)果有高度關(guān)聯(lián)性，靈敏度92%過程中，特異性可達100%去突破。

2.新一代測序方法（Next Generation Sequencing, NGS）
NGS又稱為第二代測序技術(shù)，是一種高通量測序技術(shù)達到，能一次性對幾十萬到幾百萬條基因分子進行序列測定智能設備。目前NGS方法已經(jīng)成為檢測MSI的新工具，其優(yōu)勢是可以實現(xiàn)多位點高通量檢測蓬勃發展。紀(jì)念斯隆·凱特琳癌癥研究中心（Memorial Sloan Kettering Cancer Center特點，MSK）的一項研究使用NGS方法對12,288例實體瘤病人進行檢測，判定MSI狀態(tài)重要性，并用MSI-PCR/MMR-IHC進行了驗證又進了一步。實驗證明, NGS方法較MSI-PCR方法具有更高的敏感性。

科佰生物可以提供MSI的診斷標(biāo)準(zhǔn)品多元化服務體系，保證診斷方法的檢測限規劃、靈敏度、穩(wěn)定性深度。