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技術(shù)文章 / article
細(xì)胞株的核型分析實(shí)驗(yàn)操作流程分析
原載自：www.haibayinye.com[技術(shù)資料頻道] 2021-10-12 瀏覽次數(shù)：1740
細(xì)胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法，由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群綠色化。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在有效性。然而細(xì)胞株在體外培養(yǎng)的過程中會(huì)出現(xiàn)一些問題應用提升，如細(xì)胞株無(wú)法在培養(yǎng)皿上貼壁生長(zhǎng)更加堅強，細(xì)胞株生長(zhǎng)緩慢形式，細(xì)胞株死亡等活動上。
細(xì)胞株的核型分析實(shí)驗(yàn)操作研究：
進(jìn)行該實(shí)驗(yàn)的所需材料有：姬姆色素染料新品技；秋水仙素範圍；甲醇；冰乙酸紮實做；KCL空間廣闊；0.25%胰酶至關重要。
實(shí)驗(yàn)儀器包括顯微鏡、二氧化碳培養(yǎng)箱服務品質、水浴鍋戰略布局、烘箱等。
具體實(shí)驗(yàn)步驟如下：
將傳代的細(xì)胞密度調(diào)整為1*105/ml表現明顯更佳，接種于1個(gè)10cm培養(yǎng)皿狀態，置于37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)技術的開發，約培養(yǎng)48小時(shí)后研究與應用，加秋水仙素（終濃度為0.2ug/ml），搖勻后37℃孵育1-2h更高效。
將培養(yǎng)的細(xì)胞用胰酶消化收集到10ml離心管中全面協議，1000轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘具體而言，去除上清液工具，留500ul,先將底部細(xì)胞吹勻，加入8ml 37℃預(yù)溫的0.075M KCL(37℃提前水浴)喜愛，打勻后放37℃水浴箱40min重要的角色，加入新鮮配制的固定液（甲醇/冰乙酸=2/1-3/1）2ml地混勻，室溫下放10min后向好態勢，1000轉(zhuǎn)/分離心10min平臺建設，去上清液，留500ul,先將底部細(xì)胞吹勻貢獻力量，新加入8ml固定液使用，離心清洗、重復(fù)三次后發行速度、滴片更加堅強，放入60℃烘箱老化6小時(shí)（過夜）；再將烤干的玻片放入胰酶（0.25%）中消化1min左右后性能，再放入吉姆薩染液中染色5-6min初步建立，取出用流水沖去染液后，在顯微鏡下觀察結(jié)果組建。
相關(guān)實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1.滴片的載玻片需預(yù)先泡酸處理各有優勢；
2.低滲溶液要用無(wú)菌水配制效果較好；
3.低滲溶液重要的意義，胰酶需要提前預(yù)熱；
4.固定液等多個領域、胰酶再獲、吉姆薩染色液需現(xiàn)配現(xiàn)用產品和服務。
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