ATCC細胞單純的固定液一般難以達到這些要求更讓我明白了，因此在實驗中使用兩種混和的固定液。由于Carnoy首先使用的甲醇和冰乙酸混合液而稱的卡諾氏固定液是效果良好的固定液積極。Carnoy固定液（甲醇:冰乙酸=3:l）每次使用前需臨時配制探索，長時間放置影響固定效果，固定時間15分鐘至24小時產業，冰箱滿意度、室溫均可。ATCC細胞必要時可改變甲醇和冰乙酸的比例可持續，冰乙酸比例增加主要抓手，利于細胞膨脹、染色體鋪展全過程，但易導致細胞破裂集成應用、染色體散失。

　　ATCC細胞材料和試劑:

　　1不負眾望、細胞：貼壁細胞株。

　　2調解製度、試劑：0.25％胰酶精準調控、1640培養(yǎng)基（含10％小牛血清）。

　　3應用的因素之一、儀器和器材：倒置顯微鏡解決，培養(yǎng)箱、培養(yǎng)瓶敢於監督、吸管幅度、廢液缸等。

　　ATCC細胞操作步驟:

　　1重要的作用、將長滿細胞的培養(yǎng)瓶中原來的培養(yǎng)液棄去貢獻。　　　　
2力度、加入0.5―1ml0.25％胰酶溶液明確了方向，使瓶底細胞都浸入溶液中。

　　3勇探新路、瓶口塞好橡皮塞單產提升，放在倒置鏡下觀察細胞。隨著時間的推移試驗，原貼壁的細胞逐漸趨于圓形勞動精神，在還未漂起時將胰酶棄去，加入10ml培養(yǎng)液終止消化製度保障。觀察消化也可以用肉眼預下達，當見到瓶底發(fā)白并出現(xiàn)細針孔空隙時終止消化自行開發。一般室溫消化時間約為1―3分鐘。

　　4責任、用吸管將貼壁的細胞吹打成懸液應用情況，分到另外兩到三瓶中，實踐培養(yǎng)液塞好橡皮塞組建，置37℃下繼續(xù)培養(yǎng)表現。第二天觀察貼壁生長情況∩羁套兏?！　　　「剑合号渲品椒ǎ骸　》Q取0.25克胰酶蛋白酶（活力為1：250）結論，加入100ml無Ca2+、Mg2+的Hank’s液溶解質生產力，濾器過濾除菌適應性強，4℃保存，用前可在37℃下回溫先進的解決方案。胰酶溶液中也可加入EDTA拓展，使zui終濃度達0.02％。

　　ATCC細胞在培養(yǎng)中使用的紡錘體阻斷劑為秋水仙素宣講活動，在終止培養(yǎng)前加入適量秋水仙素不斷進步，使正在分裂的細胞停留在中期，以獲得大量分裂相供分析之用效率。秋水仙素的濃度范圍比較寬規模，一般使用濃度0.05—0.8微克/毫升，在終止培養(yǎng)前處理2—4小時適應性。但在實際工作中需要借助濃度和處理時間來控制染色體的收縮程度節點。秋水仙素作用時間越長，被阻斷的中期分裂相越多落地生根，但是ATCC細胞染色體也越凝聚和收縮的特點，所以還視各實驗室經驗而定。

 

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