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我們來(lái)了解下ATCC細(xì)胞的活化方式吧

原載自:www.haibayinye.com[行情動(dòng)態(tài)]  2019-04-03  瀏覽次數(shù):1437

   我們來(lái)了解下ATCC細(xì)胞的活化方式吧
  ATCC細(xì)胞在培養(yǎng)瓶長(zhǎng)成致密單層后,已基本上飽和約定管轄,為使細(xì)胞能繼續(xù)生長(zhǎng),同時(shí)也將細(xì)胞數(shù)量擴(kuò)大實現,就必須進(jìn)行傳代(再培養(yǎng))不容忽視。
  傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞種保存下去的方法。同時(shí)也是利用培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)的必經(jīng)過(guò)程服務體系。懸浮型細(xì)胞直接分瓶就可以說服力,而貼壁細(xì)胞需經(jīng)消化后才能分瓶。
  ATCC細(xì)胞的細(xì)胞活化方式:
  1.冷凍細(xì)胞之活化原則為快速解凍分析,以避免冰晶重新結(jié)晶而對(duì)細(xì)胞造成傷害表示,導(dǎo)致細(xì)胞之死亡全面闡釋。
  2.細(xì)胞活化后,約需數(shù)日競爭力所在,或繼代一至二代引人註目,其細(xì)胞生長(zhǎng)或特性表現(xiàn)才會(huì)恢復(fù)正常(例如產(chǎn)生單株抗體或是其它蛋白質(zhì))。
  3.材料:37℃恒溫水槽溝通機製、新鮮培養(yǎng)基好宣講、無(wú)菌吸管/離心管/培養(yǎng)瓶、液氮或干冰容器領先水平。
  ATCC細(xì)胞的解凍:
  (1)操作人員應(yīng)戴防護(hù)面罩及手套,防止冷凍管可能爆裂之傷害。
  (2)自液氮或干冰容器中取出冷凍管戰略布局,檢查蓋子是否旋緊事關全面,由于熱脹冷縮過(guò)程,此時(shí)蓋子易松掉讓人糾結。
  (3)將新鮮培養(yǎng)基置于37℃水槽中回溫規模,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)基石之一。
  (4)取出冷凍管聯動,立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化共同努力,以70%酒精擦拭保存管外部組成部分,移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。
  (5)取出解凍之細(xì)胞懸浮液新的動力,緩緩加入有培養(yǎng)基之培養(yǎng)容器內(nèi)(稀釋比例為1:10-1:15)的過程中,混合均勻,放入CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)廣泛關註。取0.1ml解凍細(xì)胞懸浮液作存活測(cè)試促進進步。
  (6)解凍后是否立即去除冷凍保護(hù)劑,依細(xì)胞種類而異優勢領先,一般而言迎來新的篇章,大都不需要立即去除冷凍保護(hù)劑。倘若要立即去除推動並實現,則將解凍之細(xì)胞懸浮液加入含有5-10ml培養(yǎng)基之離心管內(nèi)薄弱點,離心1000rpm,5分鐘優化程度,移去上清液積極性,加入新鮮培養(yǎng)基,混合均勻不斷豐富,放入CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)實施體系。
  (7)若不需立即去除冷凍保存劑組建,則在解凍培養(yǎng)后隔日更換培養(yǎng)基。

 

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