人結(jié)腸癌細(xì)胞株的復(fù)蘇,遵守慢凍快融的原則。先將水浴鍋調(diào)至37-37.5度，取出凍存的細(xì)胞迅速放入后將細(xì)胞面浸至水面以下不斷搖動至融化習慣。在無菌臺內(nèi)將*培養(yǎng)基加入50ml的小培養(yǎng)瓶內(nèi)善謀新篇，約5ml左右非常重要，然后用無菌吸管從凍存管內(nèi)取出細(xì)胞服務品質，置培養(yǎng)并內(nèi)輕輕搖晃進行培訓，使細(xì)胞均勻后置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)組建。
　　人結(jié)腸癌細(xì)胞株前期需要準(zhǔn)備：
　　1.構(gòu)建好的外源基因載體
　　2.待轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系（1×106個(gè)細(xì)胞各有優勢，可傳代，倍增時(shí)間小于48小時(shí)）以及細(xì)胞培養(yǎng)條件的說明
　　3.若需要檢測靶基因的表達(dá)變化重要的意義，請?zhí)峁┫鄳?yīng)抗體
　　收到人結(jié)腸癌細(xì)胞株后持續，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。
　≡佾@。ㄒ唬┤绻?xì)胞未長滿產品和服務，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作體驗區，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶增多，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)有望。
　　(二)如果細(xì)胞已長滿共享應用，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：
　　1. 棄去培養(yǎng)液標準，用PBS（不含鈣示範推廣，鎂離子）洗1-2次。
　　2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中即將展開，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱大幅增加，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后特性，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散等特點，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶建言直達，細(xì)胞隨即脫落下來。
　　3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基將進一步，吸出充分發揮，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二成就。
　　人結(jié)腸癌細(xì)胞株實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
　　1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)重要方式，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法系統；
　　2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為玻璃制造非常重要，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
　　3．蓋玻片非常薄空間廣闊，易碎認為，取放蓋玻片時(shí)動作要輕；
　　4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞增強，可以使用較大的培養(yǎng)皿重要意義，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率更加廣闊；
　　5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差不斷完善，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。